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本生教您如何選擇細胞培養(yǎng)板?
更新時間:2022-08-08瀏覽:1185次

  本生教您如何選擇細胞培養(yǎng)板?

  細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩ā?br/>
  (一)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇:

  貼壁細胞一般用平底培養(yǎng)板。懸浮型細胞的培養(yǎng)一般用V型。

  U型培養(yǎng)板亦多用于培養(yǎng)懸浮型細胞 。V型培養(yǎng)板有時用做免疫學(xué)血凝集的實驗。

  不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什麼類型的細胞都可用﹐但當(dāng)細胞數(shù)目較少﹐如做克隆時﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實驗時﹐無論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。至於U或V型板﹐一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學(xué)方面﹐當(dāng)做兩種不同淋巴細胞混合培養(yǎng)時﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會由於重力的作用而聚集在一個很小的範(fàn)圍內(nèi)。V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實驗時﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗也可用U型板替代(加入細胞後﹐低速離心)如果是養(yǎng)細胞的話, 通常是選用平底的, 另外要特別注意材質(zhì), 標(biāo)示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養(yǎng)細胞用的。

  圓底的好像沒聽說過拿來養(yǎng)細胞。 圓底的通常是拿來做分析, 化學(xué)反應(yīng), 或是保存樣品用的, 因為圓底比較好將液體吸得乾淨(jìng), 如果用平底的就不好吸了。 不過, 如果你是要測吸光值的話, 一定要買平底的才行。

  大部分細胞培養(yǎng)都用平底培養(yǎng)板,便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致,還便于MTT檢測。

  圓底培養(yǎng)板主要用于同位素摻入的實驗,需要用細胞收集儀收集細胞的培養(yǎng),如“混合淋巴細胞培養(yǎng)"等?! ^(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,細胞板主要做細胞培養(yǎng),但也可以用來測蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不能用做細胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。如下是個用酶標(biāo)板檢測冠狀病毒IgM/IgG抗體例子:見網(wǎng)站

  常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量:不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

  培養(yǎng)器皿 面積(cm2)培養(yǎng)液量(ml) 細胞量

  96 孔培養(yǎng)板 0.32 0.1 10e5

  24孔培養(yǎng)板 2 1.0 5×10e5

  12孔培養(yǎng)板 4.5 2.0 10e6

  6孔培養(yǎng)板 9.6 2.5 2.5×10e6

  3.5 cm 培養(yǎng)皿 8 3.0 2×10e6

  6 cm 培養(yǎng)皿 21 5.0 5.2×10e6

  10 cm 培養(yǎng)皿 55 10.0 13.7×10e6

  25cm2 培養(yǎng)瓶 25 5.0 5×10e6

  75cm2 培養(yǎng)瓶 75 15~30 2×10e7

  (一)細胞培養(yǎng)板的密閉和污染問題:

  細胞培養(yǎng)板的加樣和操作:細胞培養(yǎng)板在進行細胞操作時同樣遵循嚴格無菌的原則,各項操作要保證規(guī)范、科學(xué),不對細胞的生長造成額外的影響。這其中最常見的問題就是如何保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態(tài)的影響。

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